vuzbiochemiИзвестия вузов. Прикладная химия и биотехнологияProceedings of Universities. Applied Chemistry and Biotechnology2227-29252500-1558ИРНИТУ.org/10.21285/2227-2925-2018-8-3-48-54vuzbiochemi-130Research ArticleФИЗИКО-ХИМИЧЕСКАЯ И ОБЩАЯ БИОЛОГИЯPHYSICOCHEMICAL AND GENERAL BIOLOGYСПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ L-ТИРОЗИНА В НАНОКОНСТРУКЦИЯХ НА ОСНОВЕ СУБЪЕДИНИЦ ВИРУСА ГРИППА B/FLORIDA/04/2006 И БИОРАЗЛАГАЕМОГО ПОЛИМЕРА ДЕКСТРАНАSPECTROPHOTOMETRIC DETERMINATION OF L-TYROSINE IN NANOSCALE CONSTRUCTIONS BASED ON THE INFLUENZA VIRUS B/FLORIDA/04/2006 SUBUNITS AND A BIODEGRADABLE POLYMER DEXTRANЗайцеваЕ. С.ZaitsevaE. S.e.s.zaytseva@spbniivsПоляковаИ. Н.PolyakovaI. N.i.n.polakova@spbniivsГинакА. И.GinakA. I.mbt@lti-gti.ruСанкт-Петербургский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток и предприятие по производству бактерийных препаратов Федерального медико-биологического агентстваРоссияThe Saint-Petersburg Scientific Research Institute of Vaccines and Serums and the Enterprise for the Production of Bacterial Preparations» of Federal Medical and Biologic AgencyRussian FederationСанкт-Петербургский государственный технологический институт (технический университет)РоссияSaint-Petersburg State Institute of TechnologyRussian Federation201823092019834854Copyright © Зайцева Е.С., Полякова И.Н., Гинак А.И., 20192019Зайцева Е.С., Полякова И.Н., Гинак А.И.Zaitseva E.S., Polyakova I.N., Ginak A.I.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vuzbiochemi.elpub.ru/jour/article/view/130

Цель работы заключалась в синтезе антиген-полисахаридных комплексов на основе поверхностных субъединиц вируса гриппа B/Florida/04/2006 в присутствии различных первичных аминов и изучении физико-химических свойств полученных комплексов. Синтез антиген-полисахаридных комплексов проводили конъюгацией с частично окисленным декстраном с последующим восстановлением боргидридом натрия. Исследованы биологические и физико-химические свойства синтезированных антиген-полисахаридных наноконструкций. В результате исследования физико-химических свойств полученных конъюгатов предложен спектрофотометрический метод определения тирозина в образцах антигена, модифицированного окисленным декстраном в присутствии тирозина. Определены соотношения основных компонентов, синтезированных антиген-полисахаридных наноконструкций «нагруженных» дополнительным количеством тирозина. Для синтезированных антиген-полисахаридных конструкций на 1 часть антигенов приходится от 16 до 30 частей декстрана и от 40 до 130 дополнительно взятых аминокислотных остатков. Ориентировочные молекулярные массы синтезированных конъюгатов колеблются в интервале от 1 до 2 млн Да. Наноконструкции с такими молекулярными массами сопоставимы с массами вирусных частиц и, по сути, представляют собой вирусоподобные частицы.

Our aim was to synthesize antigen polysaccharide complexes based on the surface subunits of the influenza virus B/Florida/04/2006 in the presence of various primary amines and to study their physicochemical properties. The antigen polysaccharide complexes were synthesized by conjugation with a partially oxidized dextran and subsequent reduction by natrium borane. The biological and physicochemical properties of the as-synthesized antigen polysaccharide nanoscale constructions are investigated. On the basis of the results, we have proposed a spectrophotometric method for determining tyrosine in antigen samples modified by oxidized dextran in the presence of tyrosine. Ratios between the main components of the synthesized antigen polysaccharide nanoscale constructions "loaded" with an additional amount of tyrosine have been determined. It is shown that the synthesized antigen polysaccharide complexes contain 16-30 parts of dextran and 40-130 parts of additionally taken amino acid residues per 1 part of antigens. Approximate molecular weights of the synthesized conjugates are shown to range from 1 to 2 million Da. Nanoscale constructions with such molecular weights are comparable with those of viral particles and, in fact, can be considered as virus-like particles.

ReferencesМашковский Д.М., Дидов С.Б. Лекарственные средства. М: Изд-во «Новая волна», 2002. 540 с.Машковский Д.М., Дидов С.Б. Лекарственные средства. М: Изд-во «Новая волна», 2002. 540 с.Носсел Г. Антитела и иммунитет. М.: Медицина, 1973. 174 с.Носсел Г. Антитела и иммунитет. М.: Медицина, 1973. 174 с.Никоноров И.Ю. Актуальные аспекты лечения и профилактики гриппа // Российский медицинский журнал. 2015. Т. 23, N 2. С. 66-69.Никоноров И.Ю. Актуальные аспекты лечения и профилактики гриппа // Российский медицинский журнал. 2015. Т. 23, N 2. С. 66-69.Гендон Ю.З. Высокая эффективность и безопасность вирусных вакцин и бездоказательная критика // Вопросы вирусологии. 2013. Т. 58, N 6. С. 5-13.Гендон Ю.З. Высокая эффективность и безопасность вирусных вакцин и бездоказательная критика // Вопросы вирусологии. 2013. Т. 58, N 6. С. 5-13.Зайцева Е.С., Титова Т.Г., Петровский С.В., Москвичев Б.В. Полимерные наноконструкции антигенов вируса гриппа: Сб. 7 Мос-ковского международного конгресса «Биотехнология: состояние и перспективы развития». М., 2013. T. 1. С. 128-129. URL: http://www.biomos.ru/ conference/articles.htm?god=2013 (16.04.2017)Зайцева Е.С., Титова Т.Г., Петровский С.В., Москвичев Б.В. Полимерные наноконструкции антигенов вируса гриппа: Сб. 7 Мос-ковского международного конгресса «Биотехнология: состояние и перспективы развития». М., 2013. T. 1. С. 128-129. URL: http://www.biomos.ru/ conference/articles.htm?god=2013 (16.04.2017)Zaytseva E.S. Molecular structures suitable for the development of antiviral new generation vaccines // Applied and Fundamental Studies Proceedings of the 6th International Academic Conference. St. Louis, Missouri, USA, 2014. P. 162-165.Zaytseva E.S. Molecular structures suitable for the development of antiviral new generation vaccines // Applied and Fundamental Studies Proceedings of the 6th International Academic Conference. St. Louis, Missouri, USA, 2014. P. 162-165.Зайцева Е.С. Повышение иммуногенности субъединичной гриппозной вакцины с помощью конъюгирования поверхностных антигенов вируса гриппа с окисленным декстраном: сб. статей научно-практической конференции - биеннале «Грипп: вирусология, эпидемиология, профилактика и лечение». С-Пб., 2016. С. 40-43. URL: http://www.influen-za.spb.ru/files/publica-tions/conf-2016-sbornik-materialov.pdf (20.04.2017)Зайцева Е.С. Повышение иммуногенности субъединичной гриппозной вакцины с помощью конъюгирования поверхностных антигенов вируса гриппа с окисленным декстраном: сб. статей научно-практической конференции - биеннале «Грипп: вирусология, эпидемиология, профилактика и лечение». С-Пб., 2016. С. 40-43. URL: http://www.influen-za.spb.ru/files/publica-tions/conf-2016-sbornik-materialov.pdf (20.04.2017)Зайцева Е.С., Титова Т.Г., Полякова И.Н. Изучение модификации антигена вируса гриппа B/Florida/04/2006 окисленным декстраном в присутствии различных первичных аминов: Сборник статей третьей международной научно-практической конференции «Высокие технологии, фундаментальные и прикладные исследования в физиологии и медицине». С-Пб., 2012. Т. 1. С. 130-131.Зайцева Е.С., Титова Т.Г., Полякова И.Н. Изучение модификации антигена вируса гриппа B/Florida/04/2006 окисленным декстраном в присутствии различных первичных аминов: Сборник статей третьей международной научно-практической конференции «Высокие технологии, фундаментальные и прикладные исследования в физиологии и медицине». С-Пб., 2012. Т. 1. С. 130-131.Полякова И.Н., Москвичев Б.В., Гинак А.И. Изучение химической модификации ремантадина с помощью полисахаридов // Известия Санкт-Петербургского государственного технологического института (технического университета). 2009. N 6 (32). С. 57-59.Полякова И.Н., Москвичев Б.В., Гинак А.И. Изучение химической модификации ремантадина с помощью полисахаридов // Известия Санкт-Петербургского государственного технологического института (технического университета). 2009. N 6 (32). С. 57-59.Нынь И.В., Москвичев Б.В., Иванова Г.П., Таратина Т.М. Нанобиотехнология в действии. Нанотехнологичная форма лечебного протеоллитического фермента террилитина - терридеказа® // Поликлинника. 2011. N 1-2. С. 93-95. URL: http://poliklin.ru/article201102LO_93-95.php (15.04.2017)Нынь И.В., Москвичев Б.В., Иванова Г.П., Таратина Т.М. Нанобиотехнология в действии. Нанотехнологичная форма лечебного протеоллитического фермента террилитина - терридеказа® // Поликлинника. 2011. N 1-2. С. 93-95. URL: http://poliklin.ru/article201102LO_93-95.php (15.04.2017)Taratina T.M., Moskvichev B.V. Specific activity of streptokinase modified by linear hydrophilic copolymer // Pharmaceutical chemistry journal. 1985. v. 19, N.1. P. 20-24Taratina T.M., Moskvichev B.V. Specific activity of streptokinase modified by linear hydrophilic copolymer // Pharmaceutical chemistry journal. 1985. v. 19, N.1. P. 20-24Roe J.H. The determination of dextran in blood and urine with anthrone reagent // J. Biol. Chem. 1954. V. 208, N 2. P. 889-896.Roe J.H. The determination of dextran in blood and urine with anthrone reagent // J. Biol. Chem. 1954. V. 208, N 2. P. 889-896.Государственная фармакопея Российской Федерации издание ХII часть 1. М.: Научный центр экспертизы средств медицинского применения, 2008. С. 101.Государственная фармакопея Российской Федерации издание ХII часть 1. М.: Научный центр экспертизы средств медицинского применения, 2008. С. 101.Зайцева Е.С., Талалаева О.Ю., Москвичева Я.Б., Нынь И.В., Гинак А.И. Иммуногенность химически модифицированных полисахаридами антигенов вируса гриппа // Известия Санкт-Петербургского государственного технологического института (Технологического университета). СПбГТИ (ТУ), 2012. N 15 (41). С.75-78.Зайцева Е.С., Талалаева О.Ю., Москвичева Я.Б., Нынь И.В., Гинак А.И. Иммуногенность химически модифицированных полисахаридами антигенов вируса гриппа // Известия Санкт-Петербургского государственного технологического института (Технологического университета). СПбГТИ (ТУ), 2012. N 15 (41). С.75-78.Influenza Research Database [Электронный ресурс]. URL: https://www.fludb. org/brc/pro-teinSequence.spg? ncbiProteinId=AGM53847&de-corator=influenza (11.04.2013)Influenza Research Database [Электронный ресурс]. URL: https://www.fludb. org/brc/pro-teinSequence.spg? ncbiProteinId=AGM53847&de-corator=influenza (11.04.2013)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.