vuzbiochemiИзвестия вузов. Прикладная химия и биотехнологияProceedings of Universities. Applied Chemistry and Biotechnology2227-29252500-1558ИРНИТУ10.21285/2227-2925-2019-9-4-590-599vuzbiochemi-254Research ArticleХИМИЧЕСКИЕ НАУКИCHEMICAL SCIENCESВзаимодействие гидрата 1-герматранола со щавелевой кислотойInteraction of 1-germatranol hydrate with oxalic acidБарышокВ. П.BaryshokV. P.

Барышок Виктор Петрович, д.х.н., профессор, профессор кафедры химических технологий

664074, г. Иркутск, ул. Лермонтова, 83

Viktor P. Baryshok, Dr. Sci. (Chemistry), Professor

83, Lermontov St., Irkutsk 664074

baryvik@yandex.ruЛеН.Т.З.LeNhat Thuy Giang

Ле Ньят Тхюи Занг, к.х.н., доцент, химик-исследователь

г. Ханой, ул. Хоанг Куск Вьет, 18

Le Nhat Thuy Giang, Ph.D. (Chemistry), Associate Professor, Researcher

18, Hoang Kuok Viet St., Hanoi

nhatgiang99h_05@yahoo.comИркутский национальный исследовательский технический университетРоссияIrkutsk National Research Technical UniversityRussian FederationИнститут химии Вьетнамской академии наук и технологийВьетнамInstitute of Chemistry of Vietnam Academy of Science and TechnologyViet Nam20190501202094590599Copyright © Барышок В.П., Ле Н.T., 20202020Барышок В.П., Ле Н.Baryshok V.P., Le N.T.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vuzbiochemi.elpub.ru/jour/article/view/254

Поликарбоновые кислоты участвуют во многих жизненных процессах, а герматраны проявляют высокую биологическую активность. В то же время реакции 1-замещенных герматранов с поликарбоновыми кислотами исследованы недостаточно. С одной стороны, сообщалось об устойчивых в присутствии воды соединениях герматранов с веществами, содержащими карбоксильную группу. С другой стороны, известно, что герматрановый цикл гидрата 1-герматранола в водной среде разрушается D-винной кислотой с образованием бис(µ-тартрато)ди(гидроксо)- германата(IV) триэтаноламмония. Нами исследовано взаимодействие гидрата 1-герматранола (H2O·НОGe(OCH2CH2)3N) со щавелевой кислотой (HOC(O)COOH) в воде, диметилсульфоксиде, ацетонитриле и изоамиловом спирте. Реакция в водной среде при 20–25 °С быстро приводит к расщеплению герматранового остова с образованием бис(оксалато-О,O’)дигидроксигерманата триэтаноламмония [(C2O4)2Ge(OH)2] 2- ·H + ·[(HOCH2CH2)3NH] + . Выдерживание реакционного остатка после упаривания воды при 50 °С в вакууме 2 мм рт. ст. в течение 2 ч приводит в результате топохимической реакции соответственно к моно- и бис(герматран-1-ил)оксалату (ROC(O)COOGe(OCH2CH2)3N (R = H и N(CH2CH2O)3Ge), а также к восстановлению 1-герматранола. При дополнительном выдерживании этой реакционной массы в вакууме 2 мм рт. ст. при 100 °С в течение 40 мин в ней образуются бис(герматран-1-ил)оксид О[Ge(OCH2CH2)3N]2 и герматран-1-ил)формиат. При растворении в воде полученных реакционных смесей полученные соединения вновь превращаются в бис(оксалатоО,O’)дигидроксигерманат триэтаноламмония и 1-герматранол. Нагревание смеси гидрата 1-герматранола со щавелевой кислотой в среде диметилсульфоксида и ацетонитрила наряду с 1-герматранилоксалатами приводит к образованию продукта гидролитического расщепления герматранового остова – бис(оксалато-О,O’)дигидроксигерманата триэтаноламмония, а кипячение в изоамиловом спирте – преимущественно к реакции этерификации с выходом 1-изоамилоксигерматрана более 90 %.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Polycarboxylic acids are involved in many life processes, along with germatranes exhibiting high biological activity. At the same time, the studies on the reactions of 1-substituted germatranes with polycarboxylic acids appear to be insufficient. On the one hand, compounds of germatranes with substances containing a car boxyl group were reported to be stable in the presence of water. On the other hand, the germatranic cycle of 1-germatranol hydrate in an aqueous medium is acknowledged to be decomposed by D-tartaric acid to bis(µ-tartrato)di(hydroxy)germanate(IV) triethanolammonium form. In this work, the interaction of 1-germatranol hydrate (H2O·НОGe(OCH2CH2)3N) with oxalic acid (HOC(O)COOH) in water, dimethyl sulphoxide and acetonitrile alcohol was studied. The reaction in an aqueous medium at 20–25 °С quickly leads to the cleavage of the germatrane skeleton followed by the formation of [(C2O4)2Ge(OH)2] 2- ·H+ ·[(HOCH2CH2)3NH]+ bis(oxalate-O,O') dihydroxygermanate triethanolammonium. As a result of the topochemical reaction, exposing the reaction residue following evaporation of water at 50 °С in a vacuum of 2 mm Hg for 2 h subsequently leads to the formation of (ROC(O)COOGe(OCH2CH2)3N(R=H) and N(CH2CH2O)3Ge mono- and bis(germatran-1-yl)oxalate), as well as to the reduction of 1-germatranol. Under additional exposure of the reaction mixture in a 2 mm Hg vacuum at 100 °C for 40 min, O[Ge(OCH2CH2)3N]2 bis(germatran-1-yl)oxide and (germatran-1-yl)formate is formed. Following the water dissolution of the reaction mixtures, the resulting compounds undergo another conversion to bis(oxalate-O,O')dihydroxygermanate triethanolammonium and 1-germatranol. Heating a mixture of 1-germatranol hydrate with oxalic acid in a dimethyl sulphoxide and acetonitrile medium along with 1-germatranyl oxalates leads to the formation of a hydrolytic cleavage product of the germatrane skeleton, bis(oxalate-O,O')dihydroxygermanate triethanolammonium, while the boiling of isoamyl alcohol mainly provides for the esterification reaction with a 1-isoamyloxygermatrane yield exceeding 90 %.

гидрат 1-герматранолащавелевая кислотабис(оксалато-ОO’)дигидроксигерманат триэтаноламмония(герматран-1-ил)оксалатбис(герматран-1-ил)оксалатгерматран1-ил)формиатбис(герматран-1-ил)оксидэтерификациярасщеплениетопохимическая реакция1-germatranol hydrateoxalic acidbis(oxalate-OO')dihydroxy germanate triethanolammonium(germatran-1-yl)oxalatebis(germatran-1-yl)oxalategermatran-1-yl)formatebis(germatran-1-yl)oxideesterificationcleavagetopochemical reactionАвторы благодарят И.А. Ушакова, доцента Института высоких технологий ИРНИТУ, к.х.н., за снятие некоторых спектров ЯМР 1H и 13C.The authors are grateful to I.A. Ushakov, Cand. Sci. (Chemistry), associate professor of the Institute of High Technologies, IRNITU, for the registration some 1H and 13C NMR spectra.ReferencesLukevics E., Ignatovich L. In: The Chemistry of Organic Germanium, Tin and Lead Compounds. Edited by Z. Rappoport. Chichester: John Wiley & Sons, Ltd. 2002. Vol. 2. P. 1653–1678.Lukevics E, Ignatovich L. In: Rappoport Z. (ed.) The Chemistry of Organic Germanium, Tin and Lead Compounds. Chichester: John Wiley and Sons, Ltd. 2002. Vol. 2. P. 1653–1678.Lukevics E., Ignatovich L. The Use of Metals in Medicine. In: Metallotherapeutic Drugs and Metal-Based Diagnostic Agents: M. Gielen and E.R.T. Tiekink (eds.), J. Wiley, Chichester, England. 2005. Vol. 15. P. 279–295.Lukevics E, Ignatovich L. The Use of Metals in Medicine. In: M. Gielen M, Tiekink ERT. (eds.) Metallotherapeutic Drugs and Metal-Based Diagnostic Agents: Chichester, England: J. Wiley. 2005. Vol. 15. P. 279–295.Лукевиц Э.Я., Гар Т.К., Игнатович Л.М., Миронов В.Ф. Биологическая активность соединений германия. Рига: Зинатне, 1990. 191 с.Lukevics EYa, Gar TK, Ignatovich LM, Mironov VF. Biological activity of germanium compounds. Riga: Zinatne; 1990. 191 p. (In Russian)Игнатенко М.А. Противоопухолевая активность кремний- и германий-органических соединений (обзор) // Химико-фармацевтический журнал. 1987. Т. 21. N 4. С. 402–408.Ignatenko MA. Antitumor activity of silicon- and germanium-organic compounds (review). Khimikofarmatsevticheskii zhurnal = Chemical and Pharmaceutical Journal. 1987;21(4):402–408. (In Russian)Менчиков Л.Г., Игнатенко М.А. Биологическая активность органических соединений германия (обзор) // Химико-фармацевтический журнал. 2012. Т. 46. N 11. С. 3–6. https://doi.org/ 10.30906/0023-1134-2012-46-11-3-6Menchikov LG., Ignatenko MA. Biological Activity of Organogermanium Compounds (review). Khimiko-farmatsevticheskii zhurnal = Chemical and Pharmaceutical Journal. 2012;46(11):3–6. (In Russian) https://doi.org/10.30906/0023-1134-2012-46-11-3-6Ye L., Zhang W. Synthesis and biological activity of 3-(2,8,9-trioxa-aza-1-germatricyclo-[3.3.3.0] undecane-1-yl)-hydroxycinnamic acid // Medicinal Chemistry. 2007. Vol. 3. Issue 5. P. 466–468. https://doi.org/10.2174/157340607781745465Ye L, Zhang W. Synthesis and biological activity of 3-(2,8,9-trioxa-aza-1-germatricyclo-[3.3.3.0] undecane-1-yl)-hydroxycinnamic acid. Medicinal Chemistry. 2007;3(5):466–468. https://doi.org/10.2174/157340607781745465Ye L., Luo Y., Peng X., Zhou Y., Ou X. Synthesis and biological activity of 3-(2,8,9-trioxa-aza1-germatricyclo[3.3.3.0]undecane-1-yl)-caffeic acid // Medicinal Chemistry. 2009. Vol. 5. P. 382–384.Ye L, Luo Y, Peng X, Zhou Y, Ou X. Synthesis and biological activity of 3-(2,8,9-trioxa-aza-1- germatricyclo[3.3.3.0]undecane-1-yl)-caffeic acid. Medicinal Chemistry. 2009;5:382–384.Ye L., Ou X., Peng X., Luo Y. Synthesis of 3-(2,8,9-trioxa-5-aza-1-germatricyclo-[3.3.3.0]undecane-1-yl)-3-(4-hydroxyl-3-methoxyphenyl)-propionic acid and its inhibitory effect on the cervical tumor U14 in vitro and in vivo // Medicinal Chemistry. 2012. Vol. 8. P. 595–598.Ye L, Ou X, Peng X, Luo Y. Synthesis of 3- (2,8,9-trioxa-5-aza-1-germatricyclo- [3.3.3.0]undecane-1-yl)-3-(4-hydroxyl-3-methoxyphenyl)-propionic acid and its inhibitory effect on the cervical tumor U14 in vitro and in vivo. Medicinal Chemistry. 2012;8(595–598).Лукевиц Э., Игнатович Л., Хохлова Л., Беляков С. Синтез, строение и токсичность арилгерматранов // Химия гетероциклических соединений. 1997. N 2 (356). С. 275–277.LukevicsE, Ignatovich L Khokhlova L, Belyakov S. Synthesis, Structure, and Toxicity of Arylgermatranes. Khimiya geterotsiklicheskikh soedinenii = Chemistry of Heterocyclic Compounds. 1997;2:275–277. (In Russian)ЛукевицЭ.Я., ГерманеС.К., Трушуле М.А., Миронов В.Ф., Гар Т.К., Домброва О.А. [и др.]. Синтез и нейротропная активность герматранилметиламидов и -имидов // Химико-фармацевтический журнал. 1988. N 2. С. 163–167.Lukevics EYa, Hermane SK, Trushule MA, Mironov VF, Gar TK, Dombrowa OA, et al. Synthesis and neurotropic activity of germatranylmethylamides and –imides. Khimiko-farmatsevticheskiy zhurnal = Chemical and Pharmaceutical Journal. 1988;2:163-167 (in Russian).БашкироваС.А., ДоскочЯ.Е., Бессонов А.Е., Березовская И.В., Калмыкова Е.А., Возможности сочетанного применения биологически активного вещества органического соединения германия и нестероидных противовоспалительных препаратов // Справочник врача общей практики. 2009. N 9. С. 61–65.Bashkirova SA, Doskoch YaE, Bessonov AE, Berezovskaya IV, Kalmykova EA. The effects of a combined application of biologically active substance of organic compound germanium and nonsteroid antiinflamatory drugs. Spravochnik vracha obshchei praktiki = General practitioner handbook. 2009;9:61–65. (In Russian)Пат. № 2108096, Российская Федерация, МПК A 61 K31/28, А 61К 37/04. Средство, стимулирующее в эксперименте синтез иммуноглобулинов / В.Ф. Миронов, Е.А. Чернышев, В.В. Малоч-кин, А.И. Мартынов, Г.А. Куликов; № 95110653/14; заявл. 26.06.1995; опубл.10.04.1998.MironovVF, Chernyshev EA, Malochkin VV, Martynov AI, Kulikov GA. Compound stimulating during experiment synthesis of immunoglobulins. Patent RF, no. 2108096;1995. (In Russian)Пат. № 2272624, Российская Федерация, МПК A61K31/28. Применение 1-гидроксигерматрана (моногидрата) в качестве средства актопротекторного действия и стимулирующего тканевое дыхание в организме и способ его получения / А.Д. Исаев, С.А. Башкирова, К.В. Павлов; патентообладатель ООО «Сафрон»; № 2005117990/15; заявл. 10.06.2005; опубл. 27.03.2006.Isaev AD, Bashkirova SA, Pavlov KV. Using 1-hydroxygermatrane monohydrate as actoprotecting agent and stimulating tissue respiration in body and method for its preparing. Patent RF, no. 2272624; 2005. (In Russian)Пат. № 2236196, Российская Федерация, МПК А 61 С 15/04. Зубная нить / С.И. Шкуренко, В.А. Купленая, В.В.Щербинин, А.Л. Крылов, А.В. Беляков, К.В. Галичев [и др.]. № 2003110014/15; заявл. 09.04.2003; опубл. 20.09.2004.ShkurenkoSI, KuplenayaVA, Shcherbinin VV, Krylov AL, Belyakov AV, Galichev KV, et al. Dental floss. Patent RF, no. 2236196; 2003. (In Russian)Барышок В.П., Абзаева К.А., Расулов М.М., ПодгорбунскаяТ.А. 1-герматранол-гидрат – активатор триптофанил-тРНК-синтетазы // Известия вузов. Прикладная химия и биотехнология. 2018. Т.8. N1. С.153–158. https://doi.org/10.21285/2227- 2925-2018-8-1-153-158Baryshok VP, Abzaeva KA, Rasulov MM, Podgorbunskaya TA. 1-Germatranol hydrate as an activator of tryptophanyl-tRNA synthetase. Izvestiya Vuzov. Prikladnaya Khimiya i Biotekhnologiya = Proceedings of Universities. Applied Chemistry and Biotechnology. 2018;8(1):153–158. (In Russian) https://doi.org/10.21285/2227-2925-2018-8-1-153-158ВоронковМ.Г., Левит Т.Х., Кириллов А.Ф., Барышок В.П., Козьмик Р.А., Скуртул А.М. [и др.]. Действие герматранола на морозостойкость винограда // Доклады АН СССР. 1988. Т. 299. N 2. С. 509–512.Voronkov MG, Levit TKh, Kirillov AF, Baryshok VP, Koz'mik RA, Skurtul AM, et al. Action of germatranol on frost resistance of vine. Doklady Akademyi Nauk SSSR = Doklady of the USSR Academy of Sciences. 1988;299(2):509–512. (In Russian)ShigarovaA.M.,Grabelnych O.I.,BaryshokV.P., Borovskii G.B. Possible mechanisms of the influence of germatranes on the resistance of wheat seedlings // Applied Biochemistry and Microbiology. 2016. Vol. 52. N 4. P. 410–415. https://doi.org/10.11 34/S0003683816040153Shigarova AM, Grabelnych OI, Baryshok VP, Borovskii GB. Possible mechanisms of the influence of germatranes on the resistance of wheat seedlings. Applied Biochemistry and Microbiology. 2016;52(4):410–415. https://doi.org/10.1134/S000 3683816040153Жигачева И.В., Бинюков В.И., Миль Е.М., Генерозова И.П., Расулов М.М. Влияние германийорганического соединения на функциональное состояние митохондрий растительного и животного происхождения // Научный альманах. 2015. N 7 (9). С. 955–966. https://doi.org/10.17117 / na.2015.07.955Zhigacheva IV, Binyukov VI, Mil EM, Generozova IP, Rasulov MM. Influence of organogermanium compound on the functional state of mitochondria of plant and animal origin. Nauchnyi al'manakh = Science almanac. 2015;7:955–966. (In Russian) https://doi.org/10.17117 / na.2015.07.955Пат. № 2104033, Российская Федерация, МПК A61K 47/22. Способ снижения токсичности лекарственных средств, металлов, органических и неорганических соединений и других токсинов / В.В. Щербинин, Е.А. Чернышев; № 97103219/15; заявл. 11.03.1997; опубл. 10.02.1998.Shcherbinin VV, Chernyshev EA. Method of decrease of toxicity of medicinal agents, metals, organic and inorganic compounds and other toxins. Patent RF, no. 2104033; 1997. (In Russian)Пат. № 2233286, Российская Федерация, МПК А 61 К 31/28, C07F 7/30. Биохимические комплексы германия с высокой терапевтической активностью и широким спектром использования / Е.В. Соловьев, В.В. Щербинин, Е.А. Чернышев, М.В.Котрелев, К.В. Павлов, Н.Ю. Хромова [и др.]; № 2001107254/15; заявл. 17.08.1998; опубл. 20.01.2003.Solov'evEV,Shcherbinin VV, ChernyshevEA, Kotrelev MV, Pavlov KV, Khromova NYu, et al. Germanium biochemical complexes with high therapeutic activity and broad spectrum applying. Patent RF, no. 2233286; 1998. (In Russian)Пат. № 2333912, Российская Федерация, МПК C07F 7/30. Соли 1-гидрокси-герматрана с окси-, кето- и дикарбоновыми кислотами / А.Д. Исаев, С.А. Башкирова; патентообладатель ООО «Сафрон»; № 2006146303/04; заявл. 26.12.2006; опубл. 20.09.2008.Isaev AD, Bashkirova SA. Salts of 1-hydroxygermatrane with oxy-, keto- and dicarbonic acids. Patent RF, no. 2333912; 2006. (In Russian)ГарТ.К., Хромова Н.Ю., Сонина Н.В., Никитин В.С., Полякова М.В., Миронов В.Ф. Синтез, химические свойства и их спектры Ge-замещен ных герматранов // Журнал общей химии. 1979. Т. 49. N 7. С. 1516–1522.Gar TK, Khromova NYu, Sonina NV, Nikitin VS, Polyakova MV, Mironov VF. Synthesis, chemical properties and the spectra of Ge-substituted germatranes. Zhurnal obshchey khimii = Journal of General Chemistry. 1979;49(7):1516–1522. (In Russian)Qinglan X., Jitao W., Hua L., Honggen H., Xinkan Y. Studies on metal-atranes and synthesis and molecular structure of 1-acyloxy-2,8,9-trioxa-5- aza-1-germatricycle[3.3.3.01,5]undecanes // Guangdong Weiliang Yuansu Kexue. 1998. Vol. 5. Issue 2. P. 26–31 // Chem. Abs., 130, 9909Qinglan X, Jitao W, Hua L, Honggen H, Xinkan Y. Studies on metal-atranes and synthesis and molecular structure of 1-acyloxy-2,8,9-trioxa-5- aza-1-germatricycle[3.3.3.01,5]undecanes. Guangdong Weiliang Yuansu Kexue. 1998;5(2):26–31 // Chem. Abs., 130, 9909 (1999).Baryshok V.P., Le N.T.G., Voronkov M.G. 1-Acyloxygermatranes // Russian Journal of General Chemistry. 2013. Т. 83. N 8. P. 1501–1502. https://doi.org/10.1134/S1070363213080045BaryshokVP, Le NTG, Voronkov MG. 1-Acyloxygermatranes. Russian Journal of General Chemistry. 2013;83(8):1501–1502. https://doi.org/10.1134/ S1070363213080045BaryshokV.P., LeN.T.Z. Reaction of 1-germatranol hydrate with carboxylic acids // Russian Journal of General Chemistry. 2015. Vol. 85. N 12. P.2748–2753.https://doi.org/10.1134/S1070363215120154Baryshok VP, Le NTZ. Reaction of 1-germatranol hydrate with carboxylic acids. Russian Journal of General Chemistry. 2015;85(12):2748– 2753. https://doi.org/10.1134/S1070363215120154Воронков М.Г., Кочина Т.А., Елисеев Г.С. Герматранильные производные биологически активных карбоновых кислот // Физика и химия стекла. 2012. Т. 38. N S6. С. 921–925.Voronkov MG, Kochina TA, Eliseev GS. Germatranyl biologically active derivatives of carboxylic acids. Fizika i khimiya stekla = Glass Physics and Chemistry. 2012;38(S6):921–925. (In Russian)Барышок В.П., Ле Н.Т.З. Взаимодействие гидрата 1-герматранола с D-винной кислотой в воде // Бутлеровские сообщения. 2015. Т. 42. N 4. С. 100–103.Baryshok VP, Le NTG. Interaction of 1-germatranol hydrate with D-tartaric acid in water medium. Butlerovskie soobshcheniya = Butlerov Communications. 2015;42(4):100-103. (In Russian)Лабораторная техника органической химии / под ред. Б. Кейла; пер. с чешского В.А. Вавера [и др.]. М.: Мир. 1966. 753 с.Keil B. (ed.) Laboratorní technika organické chemie. Praha: Nakladatelstvi Ceskoslovenske Akademie Ved, 1963. (Russ. ed.: Keil B. (ed.) Laboratornaya tekhnika organicheskoi khimii. Moscow: Mir; 1966, 753 p.)Воронков М.Г., Овчинникова З.А., Барышок В.П. Синтез 1-герматранола и его С-замещенных // Известия Академии наук СССР. Серия химическая. 1987. Т. 4. C. 880–882.Voronkov MG, Ovchinnikova ZA, Baryshok VP. The synthesis of 1-germatranol and its Csubstituties. Izvestiya Akademii nauk SSSR. Seriya khimicheskaya = Bulletin of the Academy of Sciences of the SSSR. Division of Chemical Sciences. 1987;4:880– 882. (In Russian)ТананаевИ.В., Шпирт М.Я. Химия германия. М.: Химия, 1967. 452 с.Tananaev IV, Shpirt MYa. Chemistry of Germanium. Moscow: Khimiya; 1967. 452 p. (In Russian)Авдуевская К.А., Тананаев И.В., Миронова В.С. Диоксалатогерманаты щелочных металлов и аммония // Журнал неорганической химии. 1968. Т. 13. N 5. C. 1313–1316.Avduevskaya KA, Tananaev IV, Mironova VS. Dioxalatogermanates of alkali metals and ammonium. Zhurnal neorganicheskoi khimii = Journal of Inorganic Chemistry. 1968;13(5):1313–1316. (In Russian)Назаренко В.А. Аналитическая химия германия. М.: Наука, 1973. 264 с.Nazarenko VA. Analytical chemistry of Germanium. Moscow: Nauka; 1973. 264 p. (In Russian)Миронов В.Ф. Термические превращения герматранола. Бис(герматранил)оксан // Металлоорганическая химия. 1993. Т.6. N2. C.243–246.Mironov VF. Thermal transformations of germatranol. Bis(germatranyl)oxane. Metalloorganicheskaya khimiya = Organometallic chemistry. 1993;6(2):243–246. (In Russian)Воронков М.Г., Овчинникова З.А., Романенко Л.С., Барышок В.П. Метод синтеза 1-органоксигерматранов // Металлоорганическая химия. 1989. Т. 2. N 6. С. 1308–1310.Voronkov MG, Ovchinnikova ZA, Romanenko LS, Baryshok VP. Method of synthesis of 1-organoxygermatranes. Metalloorganicheskaya khimiya = Organometallic chemistry. 1989;2(6): 1308–1310 (In Russian)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.