ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ ЭЛЕКТРОПОРАЦИИ НА СОХРАНЕНИЕ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ МИКРОМИЦЕТА ASPERGILLUS NIGER - ПРОДУЦЕНТА ЛИМОННОЙ КИСЛОТЫ

Изучено влияние электрического воздействия на сохранение жизнеспособности мицелиальных грибов на примере микромицета Aspergillus niger . Объектом исследования являлся селекционированный в ФГБНУ ВНИИПД штамм A.niger ВКПМ F-171 - промышленный продуцент лимонной кислоты. Электропорацию культуральной жидкости гриба проводили через 72 ч после засева питательной среды с использованием электропораторов с генераторами экспоненциальной и квадратичной волн. Выбраны условия электропорации культуральной жидкости с использованием генератора квадратичной волны и установлены параметры электропорации, не приводящие к потере жизнеспособности гриба-продуцента. При выбранных параметрах электропорации массовая концентрация органических кислот в культуральной жидкости повышается на 12,1%. Полученные данные в дальнейшем могут быть использованы для трансформации макромолекул в клетку A.niger методом электропорации.

продуцент лимонной кислоты, культуральная жидкость, электрическое воздействие, электропорация, жизнеспособность

1. Weaver G.C. Electroporation Theory: Concepts and Mechanisms // Electroporation Protocols for Microorganisms. Totowa, New Jersey: Humana Press, 1995. P. 1-26.

2. Rols M.P. Mechanism by which electroporation mediates DNA migration and entry into cells and targeted tissues // Methods Mol. Biol. 2008. V. 423. P. 19-33.

3. Saito T., Nakatsuji N. Efficient gene transfer into the embryonic mouse brain using in vivo electroporaition. // Dev.Biol. 2001. V. 240 (1). P. 237-246.

4. Rivera A.L., Gómez-Lim M., Fernández F., Loske A.M. Genetic transformation of cells using physical methods // Journal of Genetic Syndromes & Gene Therapy. 2014. V. 5, N. 4. P. 237-242.

5. García-Martínez J., Brunk M., Avalos J., Terpitz U. The CarO rhodopsin of the fungus Fusarium fujikuroi is a light-driven proton pump that retards spore germination // Scientific Reports. 2015. V. 5. Article 7798. DOI:10.1038/srep 07798.

6. Ozeкi K., Кyoya F., Hizume K., Каnda A., Hamаchi M. and Nunoкawa Y. Transfor-mation of intact Aspergillus niger by electroporation // General Research Laboratory, Ozeki Corporation, 4-9 Imazu Deraike cho, Nishinomiya-shi, Hyogo 663, Japan Received June 27, 1994. P. 2224-2227.

7. Пат. № 975799, СССР, МКИ5 С 12 N 15/00, С 12 Р 7/48. Штамм гриба Aspergillus niger Л-4 - продуцент лимонной кислоты / В.П. Ермакова, Е.Я. Щербакова, И.М. Василинец, В.М. Финько; заявитель и патентообладатель ЛНИИПП. № 2955606; заявл. 13.06.1980, опубл.23.11.1982, Бюл. N 43.

8. Пат. № 2428481, Российская Федерация, МПК С 12 Р 7/48. Способ получения лимонной кислоты / Т.В. Выборнова, Т.А. Никифорова, В.П. Комов, Л.Б. Пиотровский, М.А. Думнина, Е.В. Литасова; заявитель и патентообладатель ГУ ВНИИПАКК. № 2010112411; заяв.30.03.2010, опубл.10.09.2011. Бюл. № 25.

9. Никифорова Т.А., Мушникова Л.Н., Львова Е.Б. Основы микробного синтеза лимонной кислоты. СПб.: ЗАО «Полиграфическое предприятие № 3», 2005. 180 с.

10. Муратова Е.И., Зюзина О.В., Шуняева О.Б. Биотехнология органических кислот и белковых препаратов. Тамбов: Изд-во Тамбовского государственного технического университета, 2007. 80 с.